teknova培養(yǎng)基在優(yōu)化過程中的設計步驟
2022-06-14 1090
培養(yǎng)基是指人工模擬細胞在體內生長的營養(yǎng)環(huán)境，供給微生物、植物或動物（或組織）生長繁殖的，由不同營養(yǎng)物質組合配制而成的營養(yǎng)基質，是提供細胞營養(yǎng)和促進細胞生長增殖的物質基礎。一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽（包括微量元素）、維生素和水等幾大類物質。
teknova培養(yǎng)基的澄清度應以便于輕松的觀察到渾濁為宜、濃度應當遵循供應商建議的濃度、若無菌生產過程中使用了過濾器，能夠通過生產過程同一級別的過濾器過濾為準，如需稀釋過濾，培養(yǎng)基濃度應提供微生物生長能力驗證;同時培養(yǎng)基料液應能滿足全部覆蓋生產設備。影響該培養(yǎng)基滅菌效果的因素除滅菌溫度和時間外，還有培養(yǎng)基的成分和物理狀態(tài)、PH、微生物數量、微生物細胞含水量、微生物細胞菌齡和耐熱性、蒸汽中空氣的排除情況、攪拌和泡沫等。
teknova培養(yǎng)基的優(yōu)化過程中，實驗設計分為3個步驟：
1.篩選，基于現有商業(yè)培養(yǎng)基進行篩選，以確定重要組分的群組以及初步優(yōu)化，如使用簡單的、以實驗為依據的單次單因子方法解決復雜的優(yōu)化。
2.優(yōu)化，基于DOE對已確定的重要組分進行進一步優(yōu)化，主要優(yōu)化基礎培養(yǎng)基、補料培養(yǎng)基、一些添加物等，如使用響應曲面法找出多變量體系中的*條件。
3.驗證，對最終的培養(yǎng)基進行放大驗證，分別用優(yōu)化好的培養(yǎng)基與現用的或商業(yè)無血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞，比較各自的生長指標與抗體表達水平。
